Культуральный метод
Недостатками — длительность выполнения, высокая стоимость, ограниченная доступность, а также то, что на чувствительность метода влияют время забора материала для исследования (выделение вируса резко снижается уже через 4 дня после начала его выделения), правильность забора материала и задержки при проведении исследования. Также на ложноотрицательный результат могут повлиять недостаточное выделение вируса из эпителиальных клеток собранного материала и быстрый иммунный клиренс вируса у некоторых индивидуумов. Выявление антигена ВПГ осуществляется сегодня с помощью наиболее распространенных методов: МФА — метода флюоресцирующих антител и ИФА — иммуноферментного анализа, с использованием специфических антител — флюоресцирующих иммуноглобулинов или моноклональных антител против ВПГ, коньюгированных с ферментом (пероксидаза хрена). В основе всех этих методов лежит реакция специфического связывания антиген-антитело.
Их достоинствами являются высокая и контролируемая специфичность и чувствительность (при первичной инфекции — 50 — 75%, при хроническом рецидивирующем течении — 35 — 45%), быстрота выполнения (1 — 2 часа), возможность дифференцировки выделенных штаммов ВПГ по антигенным и биологическим свойствам, доступность оборудования, диагностических наборов, возможность автоматизации и простота выполнения. Недостатками этих методов являются высокая стоимость, недостаточно высокая чувствительность, зависимость диагностической эффективности от стадии заболевания, высокий уровень субъективности при учете результатов. Выявление ДНК ВПГ — метод молекулярной гибридизации.
Этот метод на сегодняшний день является наиболее приемлемым для определения ВПГ, чувствительность и специфичность которого достигает 100%. В основе метода лежит выявление вирусспецифических нуклеиновых кислот в исследуемом материале путем гибридизации меченным зондом.
В качестве зонда используют рекомбинантные молекулы, содержащие специфические последовательности вирусного генома, т. е. уже клонированный фрагмент ДНК.
